免疫染色とは？
免疫染色（Immunostaining）は、抗体を使って特定のタンパク質を組織切片上で検出する方法です。
抗体の特異性を利用することで、「どの細胞がどの分子を発現しているか」を可視化できます。
病理診断では腫瘍の種類や分化度の判定に、研究ではシグナル伝達や細胞間相互作用の解析に活用されます。
免疫染色の主な種類
1. IHC（Immunohistochemistry：免疫組織化学）
- 検出方法：一次抗体 → 二次抗体（酵素標識） → 基質と反応して色が沈着
- 染まり方：茶色（DAB発色）や赤色など、光学顕微鏡で観察可能
- 特徴：
- 組織構造を保ったまま標的タンパク質を検出できる
- 病理診断で最も多用される
- 臨床応用例：
- ER/PR/HER2染色（乳がんのホルモン受容体診断）
- Ki-67染色（細胞増殖マーカー）
2. IF（Immunofluorescence：免疫蛍光染色）
- 検出方法：一次抗体または二次抗体に蛍光色素を結合させて検出
- 染まり方：特定波長の光で励起され、緑・赤・青などの蛍光を発する
- 特徴：
- 複数のタンパク質を同時に染め分け可能（多重染色）
- 共焦点顕微鏡を用いて細胞内局在を三次元的に解析できる
- 研究応用例：
- 幹細胞マーカーの共発現解析
- シグナル伝達経路の局在解析
IHCとIFの違いのまとめ
| 項目 | IHC | IF |
|---|---|---|
| 検出方法 | 酵素反応による発色 | 蛍光色素による発光 |
| 観察機器 | 光学顕微鏡 | 蛍光顕微鏡・共焦点顕微鏡 |
| 染色数 | 1〜数種類 | 複数同時（多重解析） |
| 主な用途 | 病理診断 | 研究解析、局在解析 |
免疫染色の基本手順
- 抗原賦活化：ホルマリン固定などでマスクされた抗原を露出
- 一次抗体反応：標的タンパク質に特異的に結合
- 二次抗体反応：発色酵素や蛍光色素を結合した抗体で可視化
- 観察：光学顕微鏡や蛍光顕微鏡で評価
免疫染色の役割
- 病理診断：腫瘍のタイプや悪性度の評価
- 研究：細胞内局在、シグナル経路の解析、幹細胞マーカーの検出
- 臨床応用：バイオマーカー探索や治療方針決定
まとめ
免疫染色は、分子レベルでの組織解析を可能にする強力な方法です。
- IHC：病理診断で必須（発色法）
- IF：研究で多用（多重解析・局在解析）
H&Eや特殊染色に比べ、免疫染色は「特定のタンパク質を pinpoint で捉える」ことができ、診断と研究の両分野で中心的な役割を果たしています。